我國對哪些動物疫病實施強制免疫

具體內容到農業(yè)部網站上2015年水南街道動e78988e69d物疫病強制免疫計劃 一、總體要求 對高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性豬藍耳病、豬瘟等4種動物疫病實行強制免疫，群體免疫密度常年維持在90%以上，其中應免畜禽免疫密度要達到100%，免疫抗體合格率全年保持在70%以上。二、職責分工各村居對轄區(qū)內動物防疫工作負總責，組織有關部門按照職責分工，落實強制免疫計劃，保證免疫密度。各村居具體組織實施強制免疫計劃，落實動物強制免疫質量提升行動計劃，街道制定并執(zhí)行本轄區(qū)強制免疫計劃實施方案，負責強制免疫動物疫病疫苗的供應、保存和使用監(jiān)管。飼養(yǎng)動物的單位和個人應當依法履行強制免疫義務，按照獸醫(yī)主管部門的要求做好免疫工作。對規(guī)模養(yǎng)殖的動物實施程序化免疫，對散養(yǎng)的動物實施集中免疫和定期補免。三、組織實施（一）加強組織部署，確保免疫密度。各村居要按照本計劃要求，結合本地實際，及時落實強制免疫計劃實施方案，認真組織部署強制免疫工作。繼續(xù)堅持散養(yǎng)畜禽實行集中免疫和“月免疫日”相結合，規(guī)模養(yǎng)殖場按程序規(guī)范免疫的做法，確保免疫全覆蓋。（二）加強業(yè)務培訓，提升免疫質量。各村居要按照“逐級負責，分級培訓”的原則開展動物防疫技術培訓，特別要組織做好村居動物防疫員的免疫技術培訓。在實施免疫時要規(guī)范操作，按要求更換注射針頭，做好各項消毒工作，防止在免疫操作中人為傳播疫病。要加強疫苗的運輸和保存管理，保證疫苗質量。（三）加強一線指導，規(guī)范免疫管理。繼續(xù)推行“一線工作法”，切實加強對一線動物防疫工作的指導和服務。要進村入場入戶加強對免疫工作的跟蹤和督導。組建免疫專業(yè)隊，開展“拉網式”集中免疫。要規(guī)范做好免疫信息記錄、報送和免疫檔案保管工作，及時反饋免疫過程中發(fā)現的問題。要切實加強對規(guī)模場強制免疫工作的監(jiān)管。 四、疫苗監(jiān)管 （一）強化疫苗供應管理。強制免疫疫苗由省農業(yè)廳依法進行統一招標采購，實行省—設區(qū)市—縣（市、區(qū)）—鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）—村（規(guī)模場）五級逐級發(fā)放制度，原則上不得越級發(fā)放。街道要進一步規(guī)范疫苗供應工作，建立健全疫苗供應記錄檔案；要對疫苗的保存、運輸、使用等環(huán)節(jié)冷鏈體系運行情況進行監(jiān)管，確保疫苗質量的穩(wěn)定，防止疫苗浪費。嚴禁任何單位和個人倒買倒賣國家動物疫病強制免疫疫苗。 （二）規(guī)范疫苗自購行為。各村居要嚴格執(zhí)行畜禽養(yǎng)殖場自購強制免疫疫苗的備案制度。養(yǎng)殖場自購強制免疫疫苗所需經費自行承擔，疫苗只限于本養(yǎng)殖場內飼養(yǎng)的畜禽免疫用。各村居動物防疫員要加強對養(yǎng)殖場的疫苗采購和使用情況的監(jiān)管，嚴禁養(yǎng)殖場以技術服務、推廣、代銷、代購、轉讓等名義進行變相銷售或經營強制免疫疫苗的行為。 （三）及時處理好動物免疫應激反應。動物強制免疫出現應激反應的，要立即采取緊急救治措施，盡可能減少農戶損失。出現大規(guī)模應激反應的，應在12小時內報至延平區(qū)動物疫病預防控制中心。對因強制免疫應激死亡的畜禽，畜牧獸醫(yī)站要按規(guī)定及時派員到現場進行認定，嚴格執(zhí)行接到報告后12小時內認定和分級認定規(guī)定，并規(guī)范做好認定記錄和補償經費申請工作。 五、監(jiān)督檢查 （一）落實免疫責任。針對免疫工作，逐個環(huán)節(jié)細化責任，層層落實到人。對因免疫不到位引發(fā)動物疫情的，要嚴肅追究相關人員責任。對不履行強制免疫職責的單位和個人，要依法追究其責任。（二）加強免疫效果檢查。街道要按照《動物強制免疫質量提升行動計劃》的要求，切實加強免疫效果監(jiān)測，定期組織免疫效果自查與評價工作，對被抽檢的場、公司，村居存欄家畜（禽）群體抗體合格率未達到規(guī)定要求的，盡快進行補免。（三）加強動物衛(wèi)生監(jiān)管。畜牧獸醫(yī)站出具檢疫證明時，應嚴格核查調運畜禽的免疫情況，對調出縣境的種畜禽或其他非屠宰畜禽，在調運前2周進行一次加強免疫，對調運的種蛋和未達首免日齡的仔畜、雛禽，應標明其供體的免疫情況，未加強免疫或免疫情況不明的禁止調運。（四）加大督促檢查力度。各村居要及時掌握本轄區(qū)的免疫工作進展，加大自查指導力度，定期對強制免疫計劃落實情況進行督促檢查，并對檢查結果進行通報，確保免疫工作落實到位。（五）強化績效考核。要進一步加強重大動物疫病防控延伸績效管理，健全防控獎懲機制，落實防控工作責任，推進強制免疫工作落實到位。（六）做好免疫失敗的處理。街道對轄區(qū)內免疫抗體水平不達標情況和動物強制免疫失敗情況進行調查處理，認真分析原因，及時改進，并將有關情況及時報延平區(qū)動物疫病預防控制中心。 六、其他 （一）各村居在做好動物疫病強制免疫工作的同時，要統籌做好新城疫、狂犬病、豬流行性乙型腦炎等其他動物疫病的免疫工作。 （二）若國家、省、市、區(qū)動物強制免疫政策發(fā)生變動，街道將根據國家、省、市、區(qū)的要求和水南實際，另行調整本計劃。 附件：1.高致病性禽流感免疫方案 2.口蹄疫免疫方案 3.高致病性豬藍耳病免疫方案 4.豬瘟免疫方案

單克隆抗體制備的基本原理與過程？有什么意義？

哈哈~我們剛考到這題

原理：

B淋巴細胞在抗原的刺激下，能夠分化、增殖形成具有針對這種抗原分泌特異性抗體的能力。B細胞的這種能力和量是有限的，不可能持續(xù)分化增殖下去，因此產生免疫球蛋白的能力也是極其微小的。將這種B細胞與非分泌型的骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，再進一步克隆化，這種克隆化的雜交瘤細胞是既具有瘤的無限生長的能力，又具有產生特異性抗體的B淋巴細胞的能力，將這種克隆化的雜交瘤細胞進行培養(yǎng)或注入小鼠體內即可獲得大量的高效價、單一的特異性抗體。這種技術即稱為單克隆抗體技術。

過程

1）免疫脾細胞的制備 制備單克隆抗體的動物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質。免疫方法同一般血清的制備，也可采用脾內直接免疫法。

2）骨髓瘤細胞的培養(yǎng)與篩選 在融合前，骨髓瘤細胞應經過含8-AG的培養(yǎng)基篩選，防止細胞發(fā)生突變恢復HGPRT的活性（恢復HGPRT的活性的細胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活）。骨髓瘤細胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，融合前24h換液一次，使骨髓瘤細胞處于對數生長期。

3）細胞融合的關鍵:

1技術上的誤差常常導致融合的失敗。例如，供者淋巴細胞沒有查到免疫應答。這必然要失敗的。

2融合試驗最大的失敗原因是污染，融合成功的關鍵是提供一個干凈的環(huán)境，以及適宜的無菌操作技術。

4）陽性克隆的篩選 應盡早進行。通常在融合后10天作第一次檢測，過早容易出現假陽性。檢測方法應靈敏、準確、而且簡便快速。具體應用的方法應根據抗原的性質，以及所需單克隆抗體的功能進行選擇。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法最簡便，RIA法最準確。陽性克隆的篩選應進行多次，均陽性時才確定為陽性克隆進行擴增。

5）克隆化 克隆化的目的是為了獲得單一細胞系的群體。克隆化應盡早進行并反復篩選。這是因為初期的雜交瘤細胞是不穩(wěn)定的，有丟失染色體的傾向。反復克隆化后可獲得穩(wěn)定的雜交瘤細胞株?？寺』姆椒ê芏啵畛Ｓ玫氖怯邢尴♂尫?。

（1）顯微操作法：在顯微鏡下取單細胞，然后進行單細胞培養(yǎng)。這種方法操作復雜，效率低，故不常用。

（2）有限稀釋法：將對數生長期的雜交瘤細胞用培養(yǎng)液作一定的稀釋后，按每孔1個細胞接種在培養(yǎng)皿中，細胞增值后成為單克隆細胞系。第一次克隆化時加一定量的飼養(yǎng)細胞。由于第一次克隆化生長的細胞不能保證單克隆化，所以為獲得穩(wěn)定的單克隆細胞株需經2～3次的再克隆才成。應該注意的是，每次克隆化過程中所有有意義的細胞都應冷凍保存，以便重復檢查，避免丟失有意義的細胞。

（3）軟瓊脂法：將雜交瘤細胞稀釋到一定密度，然后與瓊脂混懸。在瓊脂中的細胞不能自由移動，彼此互不相混，從而達到單細胞培養(yǎng)的目的。但此法不如有限稀釋法好。

（4）熒光激光細胞分類法：用抗原包被的熒光乳膠微球標記雜交瘤細胞，然后根據抗原與雜交瘤細胞結合的特異性選出細胞，并進行單細胞培養(yǎng)。

6）細胞的凍存與復蘇

7）大規(guī)模單克隆抗體的制備 選出的陽性細胞株應及早進行抗體制備，因為融合細胞隨培養(yǎng)時間延長，發(fā)生污染、染包體丟失和細胞死亡的機率增加?？贵w制備有兩種方法。一是增量培養(yǎng)法，即將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中分離單克隆抗體。該法需用特殊的儀器設備，一般應用無血清培養(yǎng)基，以利于單克隆抗體的濃縮和純化。最普遍采用的是小鼠腹腔接種法。選用BALB/c小鼠或其親代小鼠，先用降植烷或液體石蠟行小鼠腹腔注射，一周后將雜交瘤細胞接種到小鼠腹腔中去。通常在接種一周后即有明顯的腹水產生，每只小鼠可收集5～10ml的腹水，有時甚至超過40ml。該法制備的腹水抗體含量高，每毫升可達數毫克甚至數十毫克水平。此外，腹水中的雜蛋白也較少，便于抗體的純化。

意義：

用于以下各種生命科學實驗并具有醫(yī)用價值

（1）沉淀反應：Precipitation reaction

（2）凝集實驗：haemaglutination

（3）放射免疫學方法檢測免疫復合物

（4） 流式細胞儀：用于細胞的分型和細胞分離。

（5）ELISA 等免疫學檢測

（6）BIAcore biosensor:檢測Ab-Ag或與蛋白的

親和力 。

(7) 免疫印記（western blotting)

（8） 免疫沉淀：

（9） 親和層析：分離蛋白質

（10） 磁珠分離細胞

（11）臨床疾病的診斷和治療；