茶多酚的提取方法 目前，茶多酚的提取方法主要有溶劑提取法、離子沉淀法、微波浸提法、超聲波浸提法、超臨界流體萃取法、樹脂吸附分離法6種[2-3] 。 2.1 溶劑提取法 溶劑提取法利用茶葉中多酚物質(zhì)和咖啡堿等有機物質(zhì)在不同的溶劑中溶解度的差異進行分離，利用能與溶劑不互溶的茶多酚萃取劑將茶多酚萃取提純。其工藝路線為： 茶葉粉碎--浸提--有機溶劑脫色、脫咖啡堿--乙酸乙酯萃取--回收溶劑干燥--茶多酚[4] 常用的浸提劑為水或者62616964757a686964616fe78988e69d8331333335343438水與其他有機溶劑互用，并得出水與有機溶劑互用比純水用作浸提劑效果要好。溶劑萃取法優(yōu)點是：(1)容易實現(xiàn)工業(yè)化，整個操作工藝流程可以為間歇或者連續(xù)生產(chǎn)且穩(wěn)定可靠；(2)有機溶劑可以回收利用。缺點主要有：(1)得率較低，往往采用其他手段來提高其得率；(2)較高溫度的浸提條件使得產(chǎn)品在提取過程中易氧化，產(chǎn)品純度也比較低；(3)茶多酚中咖啡堿的含量是一項很重要的指標，氯仿在工藝中用作咖啡堿的脫除，氯仿等有毒的有機溶劑的使用影響到茶多酚的質(zhì)量和應(yīng)用范圍(如不能用于食品工業(yè))，同時大量有毒、易燃的有機溶劑對生產(chǎn)安全產(chǎn)生一定隱患；(4)萃取工藝一般采用多級萃取操作，溶劑回收需要進行多級蒸餾，工藝操作復(fù)雜，能耗大。 2．2離子沉淀法 離子沉淀法是利用茶多酚在中性或堿性條件下可以跟跟金屬離子Al3+ 、Bi3+ 、Ca2+ 、Ag+ 、Hg2+ 等產(chǎn)生絡(luò) 合沉淀的特點，使其從浸提液中分離出來，從而與水溶液中的咖啡堿、單糖、氨基酸等組分分離，得到純度較高的茶多酚[5] 。其一般工藝路線為： 茶葉原料—乙醇提取—減壓過濾—金屬離子沉淀--酸溶—乙酸乙酯萃取--濃縮—真空干燥—精制茶多酚 [6] 采用茶多酚與沉淀劑絡(luò)合沉淀從而純化茶多酚的優(yōu)點在于：(1)產(chǎn)品純度高；(2)減少了大量有機萃取劑的使用，減少一定量的能耗；(3)工藝流程上來看，包含了有機溶劑以及沉淀劑的回收利用，工藝簡單易實現(xiàn)，沉淀劑等輔料成本較低。缺點在于：(1)金屬離子的使用限制了茶多酚的應(yīng)用范圍，某些殘留在茶多酚中有毒金屬離子含量較高，其產(chǎn)品不能為醫(yī)藥行業(yè)所接受；(2)在生產(chǎn)過程中大量廢渣的產(chǎn)生無疑對環(huán)境造成巨大壓力；(3)轉(zhuǎn)溶過程中程序較為繁瑣，導(dǎo)致部分多酚被氧化，降低得率； (4)生產(chǎn)設(shè)備條件要求苛刻，對生產(chǎn)裝臵，輔助設(shè)備以及管路的耐腐蝕性有較高的要求。 2.3微波浸提法 該法的基本原理是利用分子在微波場中發(fā)生高頻的運動，擴散速率增大，從而將茶多酚等浸提物在微波的作用下快速浸取出來。使用微波萃取的優(yōu)化條件為80o C，固液比為1：15，時間1．5min[7] 。王瑩采用微波輔助萃取技術(shù)提取日照綠茶中的茶多酚，提取率高達14．21％[8] 。Ezzohra Nkhili等比較了微波輔助水提取(MWE)和傳統(tǒng)的加熱輔助水提取(CWE)兩種方法對茶多酚提取的影響，結(jié)果表明，用MWE方法提取的茶多酚含量高于CWE 方法，特別是EGCG的含量達到77．14 mg／g，高于用CWE方法的64．18 mg [9] 。 利用微波輔助浸提，可縮短浸提時間，避免了茶多酚的氧化，有效地保護原料中的活性成分；提取率高，節(jié)約了溶劑，大大提高了提取效率；避免使用有毒溶劑、產(chǎn)品安全。微波輔助萃取技術(shù)節(jié)省能源，省工、省時、對環(huán)境友好、宜于批量浸提、便于推廣等優(yōu)點，是一種可持續(xù)發(fā)展的技術(shù)。 2.4超聲波浸提法 超聲波輔助提取茶多酚，最佳條件為70o C,lOOW超聲輻射下用80％乙醇按料液比1：10提取20min [10—11] 。提取的茶多酚含量較高，防止茶多酚被氧化，保持高品質(zhì)。工藝過程為： 茶葉+乙醇—超聲提取—過濾—蒸發(fā)濃縮—氯仿萃取—乙酸乙酯萃取—蒸發(fā)回收酯—烘干的粗茶多酚 --純化[12] 超聲波提取茶多酚的工藝簡單，尤其是結(jié)合溶劑法、沉淀法和樹脂吸附法用于提取制備，取得了較好的成效。該方法具有提取溫度低、減少浸提所需時間，提高浸提效果，避免茶多酚在長時間高溫下氧化的可能，回收率高、氧化損耗小，節(jié)時、節(jié)能、提取率高等優(yōu)點，同時避免了有毒溶劑的使用，提取工藝成本低，綜合經(jīng)濟效益顯著，具有良好的工業(yè)推廣價值 。 2．5超臨界流體萃取法 超臨界流體萃取法是一種新型分離方法，利用溫度和壓力略超過或靠近臨界的介于氣體和液體之間的流體作為萃取劑，從固體或液體中萃取某種高沸點和熱敏性成分，達到分離和提純的目的 [13] 。工藝過程為： 茶葉--茶汁--濃縮--超臨界CO2萃取--有機溶劑萃取--酯相濃縮干燥--超臨界C02萃取--茶多酚[4] 。 超臨界CO2流體萃取法提取茶多酚與其他的提取分離技術(shù)相比較，其主要的優(yōu)點是：(1)采用CO2：作為萃取劑，大大降低了工藝對環(huán)境的污染，產(chǎn)品中幾乎沒有毒金屬或者有機溶劑的殘留，目前超臨界流體是唯一能取代毒性較大的有機溶劑對咖啡堿等進行萃取的物質(zhì)；(2)萃取條件溫和，有效地防止茶多酚的氧化。其主要的缺點是： (1)兒茶素等在非極性的超臨界CO2 流體中溶解度很低，往往需要用到醇類溶液作為夾帶劑，提取率和純度不高；(2)萃取設(shè)備條件比較嚴格，往往需要特定設(shè)計，工藝投資額大，生產(chǎn)成本比較高，目前工業(yè)化只能小規(guī)模生產(chǎn)，萃取物要經(jīng)過多次精制才能提純。 2．6樹脂吸附分離法 樹脂吸附法分離原理是根據(jù)吸附樹脂對多酚類有選擇性吸附、解吸作用的特性來實現(xiàn)茶多酚與其它浸提物組分之間的分離。樹脂吸附法對樹脂的種類以及結(jié)構(gòu)有較高要求，多孔樹脂的比表面積、孔隙率以及樹脂的極性都影響了對茶多酚的吸附容量。極性多酚易與極性樹脂以氫鍵等方式進行締合，再將吸附了茶多酚的樹脂用合適的有機溶劑進行洗脫，然后用乙酸乙酯等將洗脫液進行萃取，從而有選擇性地將茶多酚從其浸提液中分離。其工藝流程為： 茶葉--熱水提取--濃縮--吸附柱吸附--解脫劑洗脫--茶多酚洗脫液減壓蒸餾回收溶劑--真空干燥--粉狀粗茶多酚--水溶解成溶液--乙酸乙酯提取--減壓蒸餾回收溶劑--真空干燥--粉晶態(tài)茶多酚[4] 。 樹脂吸附法分離茶多酚的優(yōu)點為：(1)選擇茶多酚產(chǎn)物中一種或幾種的兒茶素目標性強，可以有選擇地進行吸附分離目標兒茶素； (2)純度高，同時對咖啡堿的脫除率高；(3)產(chǎn)品的應(yīng)用范圍廣；(4)樹脂吸附一解吸過程一般都在比較溫和的溫度下進行，避免了茶多酚的損失；(5)過程中避免了有毒有機溶劑的使用并且容易回收，此方法是目前茶多酚清潔化生產(chǎn)的主要研究趨勢。主要的缺點為：(1)樹脂再生的重復(fù)使用率限制了樹脂吸附法生產(chǎn)茶多酚的規(guī)模，因此往往只能適合小規(guī)模的生產(chǎn)；(2)樹脂的價格昂貴給生產(chǎn)成本造成了壓力；(3)整個過程中使用了大量的有機溶劑，脫附過程往往較繁瑣。 6結(jié)論與展望 茶多酚作為一種天然的抗氧化劑，在食品、化妝品、保健品等應(yīng)用領(lǐng)域的需求逐步的擴大。目前部分已經(jīng)工業(yè)化的提取純化工藝相對比較落后，都存在著一定的弊端，有毒有機溶劑以及某些重金屬離子都會限制茶多酚制品在食品或者醫(yī)藥方面的應(yīng)用；大孔徑樹脂吸附法以及超臨界CO2流體萃取法是比較熱門的方法，但是巨額成本及操作費用限制了茶多酚生產(chǎn)的規(guī)?；?。理想的茶多酚提取純化工藝技術(shù)應(yīng)該滿足工藝過程簡單，操作方便，且安全性好，提取率高，產(chǎn)品純度好，無毒性或毒性小，適應(yīng)工業(yè)生產(chǎn)需要等要求，所以新型茶多酚提取純化工藝有待于進一步開發(fā)研究。 （1）新型萃取劑的開發(fā)應(yīng)用到茶多酚的提取中。雙水相萃取技術(shù)是新出現(xiàn)的一種極有前景的新型分離技術(shù)，與離子液體、超臨界流體并稱為21世紀3大綠色溶劑。與傳統(tǒng)的有機溶劑萃取劑相比，雙水相萃取技術(shù)分相時間短，有助于活性物質(zhì)在兩相中的質(zhì)量傳遞，幾乎沒有溶劑殘留問題，產(chǎn)品對人體無害，工藝易于放大和連續(xù)操作，能夠為生物活性物質(zhì)提供一種溫和的環(huán)境，不易使茶多酚氧化失活。雙水相的種類以及組成，茶多酚、咖啡堿等在雙水相中的分配關(guān)系是雙水相萃取茶多酚今后研究的重點。 (2)超大孔連續(xù)床用于茶多酚的純化。超大孔連續(xù)床內(nèi)有許多尺寸達數(shù)微米至數(shù)百微米的超大孔隙，并可在孔隙內(nèi)進行化學修飾，使其可以與茶多酚形成氫鍵，使原料液中細胞碎片等固相順利通過，并可實現(xiàn)與目標物進行締合，從而有效分離出目標茶多酚，且成本較低，可以將離心、過濾、濃縮和層析分離多個步驟集于一體，目標物在床內(nèi)的停留時間短，選擇性強。超大孔連續(xù)床的制備以及孔隙內(nèi)的化學修飾一直是新型生物分離的關(guān)鍵，床體的強度、尺寸以及再生等都有待于進一步研究。